在第四集中，在前一集裡出現的克萊兒（亞莉拉特飾）將和艾莉絲再度攜手合作。喬娃維琪和亞莉拉特的默契就像艾莉絲和克萊兒一樣。「我們是天生一對，艾莉拉特讓故事增添真實感，和一個很勇敢、聰明的女性對手合作是很棒的事，她驅使我去做到最好，而我也讓她演得更棒。」喬娃維琪說。

「《惡靈古堡》故事裡最特殊的部分之一，是出現兩個很厲害的女性。艾莉絲和克萊兒兩個都是戰士，但艾莉絲被塑造成比較神祕的形象，而克萊兒代表的是比較人性的部分，但她擁有打不死的過人精神。她們兩人會不惜一切尋求生存之道，但同時她們也互相扶持。」拉特說。在第三集片尾，克萊兒帶領一群生存者要逃往她們認為是安全之地的阿拉斯加。但當艾莉絲在北極荒地裡發現克萊兒時，她卻完全失憶。

「在第三集裡，克萊兒是被迫當上領袖，但在第四集裡，她卻很自然的帶頭領導，開始完成她的使命。克萊兒在片中，體驗了信念和信賴兩件事，但她同時還得學會面對自我犧牲的掙扎，因為她和艾莉絲失去了很多朋友，很多理想和希望也跟著破滅，而現實環境也變得更難生存。」拉特說。

在拉特心中，《惡靈古堡》拍成3D版絕對是對電影加分的安排。「這部片讓我們能走在3D電影的前端，看到很多西東西被創造出來是很爽的一件事。」儘管片中用了很多新科技來拍攝，但某些製作過程還是得要求演員在鏡頭前做到某些動作效果。「蜜拉和我都喜歡自己親自下場挑戰危險特技，拍這部片的某些樂趣就是來自這些體能要求。像是在大雨中、積了高達6英吋的泥巴裡拍攝。現場工作人員不斷滑倒，我臉得面對著泥巴地，一抬頭上方則有110人穿著膠鞋、戴著帽子包著雨具在拍攝。當時我心想不妙，難道我一整天都得這樣搞嗎？」拉特說。

在前幾集中，艾莉絲都會和她遇上的倖存者一塊團結打殭屍，在第四集中，導演安德森將電玩裡的經典角色克里斯（溫沃斯米勒飾）放進來。克里斯是克萊兒的哥哥，他的出現強化了人類軍團間情同兄弟姊妹的關係。「我很喜歡導演強調這群倖存者像一家人的感覺，但克萊兒和克里斯的重逢並沒有搞得很戲劇化，兩人反而是直接聯手大戰殭屍。」拉特說。

演了四年「越獄風雲」影集的溫沃斯米勒在《惡靈古堡IV：陰陽界》裡的出場戲，也剛好是被關在監獄裡。「克里斯曾在軍隊裡工作，將這座監獄用來做為病毒爆發時的中繼站。沒想到當犯人被放出來打殭屍時，卻誤把克里斯當成獄警而把他留在監獄裡。」米勒說。一開始，米勒很懷疑到底要不要接下這個角色。「當我在讀腳本時，我以為那是在開玩笑，因為我在片中的第一句台詞是：我知道如何逃離這裡，這跟我演「越獄風雲」的感覺太像了。但事後我想了想，如果觀眾並沒看過「越獄風雲」的話，那這樣的說法也沒什麼不對，而對於看過四季、81集影集的觀眾而言，這也是個很酷的方式讓他們回味。」米勒說。

克里斯和克萊兒兩兄妹在病毒爆發後不久就失散，兩人都誤以為對方可能遭遇不測。「克里斯被關在獄中多年，當他突然看到多年未見的妹妹時，情緒是相當澎湃激動的，但因為這是《惡靈古堡》電影，劇情很快就會發展到角色間的衝突部分。」米勒說。

和女主角蜜拉喬娃維琪合作對溫沃斯米勒而言，是再棒不過的事。「我以前對她的印象是個很漂亮、很能打的演員，不管拿刀和劍都能舞的很帥。沒想到她本人相當活潑，笑聲相當爽朗，人也很幽默，簡直像個男生一樣，這些性格加上她的美貌和智慧簡直是不可思議的組合！」

片中另一個新角色路德威斯特是由波里斯寇喬飾演，他的角色是艾莉絲出現前，帶領倖存民兵抵抗殭屍的領導。「路德是天生的領袖，他曾是運動員，為人非常有自信、有紀律，而這也讓他性格穩健，並讓他自認有必要出面帶頭領導。」寇喬過去曾是職業網球選手，後來因傷轉行，曾在電影《獵殺代理人》裡演出。「我的背景讓我能很快進入路德這個角色，為了這個角色，不論是體能或內在我都得隨時保持在準備好的狀態，在上戲前，我常在片場邊做伏地挺身和仰臥起坐，讓自己隨時充滿熱血幹勁。」寇喬說。艾莉絲和路德一見面就相當投緣。「艾莉絲很堅強又有自信，露德很欣賞她，兩人很自然的並肩作戰。」

寇喬形容《惡靈古堡IV：陰陽界》是該系列中最恐怖的一集。「片中的殭屍相當恐怖，也超難應付，而這次的殭屍裡還多了一個從電玩角色『斧頭人』，他長得相當高大可怕，站在他身旁我變得非常迷你。」

新片中另一個經典反派就是保護傘公司的主席亞柏威斯克。「威斯克是保護傘公司的代表，他會不惜一切得到他要的。」製片卡莫帝說。威斯克原本在電玩裡就是一個重要的角色。「威斯克在早期的遊戲裡是個好人，但後來卻越來越壞，飾演這個角色的尚恩羅伯特很用心的詮釋這個角色。」製片傑瑞米波特說。

威斯克自己也受到T病毒的傳染，所以他的能力變得越來越強大。「威斯克是個標準的壞蛋，不管別人用刀、用油或任何東西殺都他沒用，他就是打不死。」羅伯特說。飾演這麼大尾的反派是羅伯特從小到大的夢想。「我得不時掐自己才能相信，我竟然完成我從六歲就想做的事，從小我就看阿諾和布魯斯威利的片子長大，希望長大能像他們一樣演戲。」

因為知道威斯克很難搞，所以艾莉絲得想盡辦法對付他，兩人的過招場面都相當精彩震撼。「雖然和喬娃維琪在劇中勢不兩立，但在拍片空檔她卻是你無法想像的甜姐兒。不過，當你聽到她穿皮靴走進片場時，你就知道又要開始打了，那種轉變真的很特別。」羅伯特說。「在戲裡，羅伯特就像魔鬼終結者一樣，他不像上一集裡那麼好對付，我想觀眾看到他大開殺戒會很過癮。」喬娃維琪說。